不同情况下如何清洗层析柱
发布时间: 2023-12-19 点击次数: 1661次
层析柱是一种用于分离、纯化和分析样品的实验室设备,通过根据样品组分的亲和性差异,在填充物上进行相互作用和分离。清洗层析柱是保持其性能和延长寿命的重要步骤。
以下是一般情况下清洗层析柱的步骤:
1.溶剂预洗:首先,通过使用一种与待测样品不相容的溶剂进行预洗。例如,如果使用有机溶剂进行柱层析,则可以选择用纯水或其他无机溶剂进行预洗。这有助于去除残留在柱内的杂质。
2.淋洗:接下来,使用适当的淋洗溶剂进行柱层析。淋洗溶剂通常是色谱法中使用的溶剂,并根据柱的类型和分离模式进行选择。将淋洗溶剂以适量的流速通过柱心,通常为柱容积的1-2倍。这有助于冲洗柱内的样品残留物和溶剂中的离子,以准备下一次分析。
3.温和清洗:对于较为粘附的样品,可以使用温和的清洗条件。例如,可以使用配制的清洗溶液(如酸性、碱性或有机溶剂)进行柱洗脱。根据样品和柱填料的特性,选择适当的酸性或碱性条件,并调整浓度和pH值。
4.高强度清洗:对于难以去除的残留物,可以尝试使用高强度的清洗剂。例如,在某些情况下,可以使用有机溶剂混合酸或有机溶剂混合碱来清洗。但是,使用高强度清洗剂要小心,以避免对柱填料造成损伤。
5.淋洗:最后,用纯溶剂(如纯水或其他无机溶剂)进行最后的淋洗,以确保将所有清洗剂冲洗掉。